在生物医疗领域,电泳缓冲液的配制对实验结果至关重要。本文将介绍如何配制尊龙凯时品牌的电泳缓冲液,包括50×Tris-乙酸(TAE)和5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液的成分及终浓度。
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
配制1L的50×TAE溶液,各成分的用量如下:
- 2mol/L Tris碱:242g
- 1mol/L 乙酸:571ml的冰乙酸(174mol/L)
- 100mmol/L EDTA:200ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 用水补足至1L
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
配制1L的5×TBE溶液,各成分的用量如下:
- 445mmol/L Tris碱:54g
- 445mmol/L 硼酸盐:275g
- 10mmol/L EDTA:20ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 用水补足至1L
染料配制
在电泳过程中,染料的使用也非常关键,以下是尊龙凯时推荐的染料配制方法:
1%溴酚蓝
将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100ml水中,搅拌或涡旋混合,直到完全溶解。
1%二甲/苯青FF
将1g二甲/苯青FF溶解于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml 溴化乙锭
小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,添加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用铝箔包裹装液管并储存于4℃。
凝胶上样液配制
凝胶上样液是实验成功的关键之一,以下是不同类型的凝胶上样液配方:
6×碱性凝胶上样液
配制10ml溶液,各成分用量:
- 0.3N氢氧化钠:6mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型):300μl
- 0.15%溴甲/酚绿
- 0.25%二甲/苯青FF
- 10N氢氧化钠:120μl
- 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):18g
- 水补足至10ml
6×聚蔗糖凝胶上样液
各成分用量:
- 0.15%溴酚蓝
- 0.15%二甲/苯青FF
- 5mmol/L EDTA
- 15%聚蔗糖(400型):15ml
- 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):15g
- 水补足至10ml
总结
上述配方为实验室中常用的电泳缓冲液和染料的配制方法。通过使用尊龙凯时品牌的产品,可以确保实验的准确性和可靠性。在执行这些实验时,请务必遵循安全标准并正确操作。