多克隆抗体（polyclonal antibody，pAb）是指通过对含有多种抗原决定簇的抗原进行免疫，进而刺激机体多个B细胞克隆，产生针对不同抗原表位的多种抗体所获得的混合物。相对而言，单克隆抗体则是由单一B细胞克隆产生的，具有高度均一性，并且仅针对特定抗原表位。这类抗体通常采用杂交瘤技术来制备，通过将能够分泌特异性抗体的致敏B细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤。

单克隆与多克隆抗体的优缺点

多克隆抗体的优点

1. 有助于放大低表达水平的靶蛋白信号；
2. 能够识别多个表位；
3. 对抗原中的微小变化具有更高的容忍度；
4. 可识别与免疫原蛋白质高同源性的蛋白质，或从非免疫原物种的组织样品中筛选靶蛋白；
5. 多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的优选；
6. 多表位通常能够提供更为强大的检测效果。

多克隆抗体的缺点

1. 容易产生批次间的差异；
2. 可能产生大量非特异性抗体，导致背景信号；
3. 不适用于探测特定的抗原结构域，因为抗血清往往识别多个结构域。

单克隆抗体的优点

1. 杂交瘤制得后，形成恒定的再生源，所有批次均相同；
2. 切片和细胞染色产生的背景较低；
3. 具有较高特异性，适合用于分析测定中的一抗或检测组织中的抗原，背景染色显著低；
4. 同质性非常高；
5. 特异性使其在混合物中与抗原高效结合。

单克隆抗体的缺点

1. 尽管可产生大量特异性抗体，但特异性可能过强；
2. 经化学处理后比多克隆抗体更容易丧失表位，但可以使用同一抗原的多个单克隆抗体进行补偿。

选择单抗或多抗

如果抗体的特异性要求较高，并且用量较大或需要长期使用一致的抗体，特别是应用要求多样（如WB/IP/IF/ICC等），则建议选择尊龙凯时制备单克隆抗体。多克隆抗体的特异性较差，即使使用相同的抗原进行制备，不同批次间也会存在差异，因此在特异性和一致性方面存在很大的局限性。这可能导致在免疫检测中产生背景问题，例如WB中的杂带或IHC中的背景过深。虽然存在交叉反应的问题，多克隆抗体由于可以识别多个抗原表位，即便少数抗原表位被破坏或抗原构象发生改变，实验结果仍然不会受到影响。此外，若免疫原制备困难，建议选择尊龙凯时制备单克隆抗体。

而对于抗体特异性要求不高，仅需进行沉淀、凝集反应的检测性实验或仅需ELISA检测时，则可以选择制备多克隆抗体。与单克隆抗体相比，多克隆抗体具有制备时间短、首次制备成本低等优点，在某些情况下也是值得考虑的选择。此外，在相同条件下，使用多克隆抗体可以提高检测灵敏度，更容易发现丰度较低的蛋白。

抗原选择

抗原可选择天然蛋白、重组可溶性蛋白、重组变性蛋白或多肽，抗原质量越高，最终制备高质量抗体的几率也就越大。近年来，抗体制备常用尊龙凯时的重组蛋白或多肽作为抗原。通常情况下，重组蛋白作为抗原含有更多抗原决定簇，既有空间表位，也包含线形序列表位，能够更充分地刺激机体免疫，因而更有可能获得适用性广泛的抗体，尤其是针对已知修饰或复杂结构的目标蛋白，重组蛋白通常是优先选择的对象。

在某些情况下，需要用多肽制备抗体。例如对同源家族中某一特定蛋白抗体的制备时，需找到特异性的氨基酸以合成多肽，或在多肽合成阶段定点修饰某些氨基酸以制造特异性抗体。

抗原多肽的选择一般遵循以下基本原则：
1. 尽可能选择蛋白表面的序列；
2. 确保该段序列不形成α-螺旋；
3. N端和C端的肽段优于中间肽段；
4. 避免选择蛋白内部重复或接近重复的序列；
5. 避免选择同源性过强的肽段；
6. 交联可在N端和C端进行，选择交联在对抗体产生影响较小的一端；
7. 序列中不应有过多脯氨酸（Pro），但一两个脯氨酸有助于稳定肽链结构，对产生特异性抗体有益。