细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号诱发的程序性细胞死亡方式，其显著特征包括细胞膜的穿孔、细胞膨胀并最终破裂。此过程依赖于炎性半胱天冬酶，主要为caspase-1、4、5和11，并伴随大量促炎因子的释放，如IL-1β和IL-18。细胞焦亡的形态特征、发生机制及调控过程均与凋亡和坏死等其他细胞死亡方式显著不同。

尊龙凯时推出的BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒，采用比色光度法来检测与细胞焦亡相关的蛋白酶Caspase的活化以及细胞质膜的破裂情况。这款试剂盒基于caspase-1/4/5对相应底物的催化能力，使其产生黄色的pNA，并在405nm附近表现出强吸收特性，从而通过测定吸光度来评估细胞焦亡相关蛋白酶的活性。

此外，该试剂盒还利用酶标仪或荧光酶标仪，以及容量不超过100μl的分光光度计或荧光光度计，适用于细胞培养过程中对细胞焦亡的检测。尊龙凯时的BBcellProbe®系列还提供了AFC、R110和AMC等荧光标记的焦亡检测试剂盒。相比于传统的比色法，荧光法检测的灵敏度更高，因此在具备荧光检测条件的情况下，建议选择荧光法检测的试剂盒。如果缺乏荧光检测条件，则可使用尊龙凯时的比色法细胞焦亡检测试剂盒，前提是确保样本中细胞焦亡程度达标。

检测方法：

• 酶标仪/荧光酶标仪
• 分光光度计/荧光光度计
• 激光共聚焦显微镜
• 流式细胞仪

样本类型：

• 细胞

实验步骤：

1. 配制裂解缓冲液和检测缓冲液。
2. 样品处理：
   1. 收集细胞，离心2-3分钟，仔细吸取培养基，尽量吸干，收集细胞。
   2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次后尽量吸干上清。
   3. 向细胞中加入50μl冷裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
   4. 在冰上持续振荡25-40分钟。
   5. 在4℃、10000×g条件下离心10分钟。
   6. 将上清转移至另一预冷的干净离心管中，并置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
3. 对上述处理的上清液进行蛋白定量。
4. 进行焦亡检测。

通过以上步骤，研究人员可以精确地检测细胞焦亡，推动相关生物医学研究的深入。选择尊龙凯时的产品，确保实验的可靠性与高效性。